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CAS号:4691-65-0
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英文名称:5'-IMPdisodium salt
分子式
C10H14N4NaO8P
分子量
372
EINECS号
225-146-4
MDL
MFCD00036201
Smiles
O[C@@H]1[C@@H]([C@@H](COP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C=NC2C(NC=NC1=2)=O)O.[NaH] |&1:1,2,3,11,r|
InChIKey
BSLOBPKGJXLZLN-JHVGCDEENA-N
乙二醇化学百科
基本信息
物化性质
安全信息
生产及用途
白色粉末肌苷酸二钠为无色至白色结晶,或白色结晶性粉末,含约7.5分子结晶水,不吸湿,40℃开始失去结晶水,120℃以上成无水物。味鲜,鲜味阈值为0.025g/100mL,鲜味强度低于鸟苷酸钠,但二者并用有显著的协同作用。当二者以1:1混合时,鲜味阀值可降至0.0063%。与0.8%谷氨酸钠并用,其鲜味阀值更进一步降至0.000031%。溶于水,水溶液稳定,呈中性。在酸性溶液中加热易分解,失去呈味力。亦可被磷酸酶分解破坏。微溶于乙醇,几乎不溶于乙醚。肌苷酸二钠作为增味剂,营养添加剂紫外吸光度 用0.01mol/L盐酸配制1/50000试样液,该溶液在波长250nm±2nm处有最大吸收值。A250/A260为1.55~1.65,A280/A260为0.2~0.3。 核糖试验及有机磷酸盐试验均阳性,方法同“02006,5L鸟苷酸二钠”。 钠盐反应阳性(IT-28)。 溶解性 溶于水,微溶于乙醇,几乎不溶于乙醚。.准确称取试样约500mg,移入1000ml容量瓶内,用0.01mol/L盐酸溶解后定容,混合。取此溶液10.0 ml移入250ml容量瓶中,以0.01mol/L盐酸定容,混合。用0.01mol/L盐酸液作为对照样,在波长250nin处测吸光度(A),液层宽1crn。试样中肌苷酸二钠(C10H11N4Na2O8P)的含量按下式计算: 肌苷酸二钠含量(%)=A/310×25000/试样量(mg)×100/(100-水分(%)) ×100ADI不作特殊规定(FAO/WHO,2001)。 LD5014.4g/kg(大鼠,经口)。 0.1%~1.0%饲料量慢性试验饲养大鼠6个月后,体重增加,血浆、肝、肾、脾、睾丸、心、肺等重量及组织均无异常现象。安全性高。可安全用于食品(FDA,§172.535,2000)。 EEC—HACSG规定不得用于婴幼儿食品。GB 2760—96:各类食品,以GMP为限。 FAO/WHO(1994):午餐肉、火腿、咸肉等肉类 化学性质 无色至白色结晶,或白色结晶性粉末。平均含7.5个分子的结晶水。无臭,有特殊滋味。味觉阈值0.012%。不潮解。熔点不明显,180℃时呈褐色,230℃左右时分解。性稳定,在一般食品加工条件下(Ph值为4~7)、100℃加热1h无分解现象。与L-谷氨酸钠对鲜味有相乘效应(如以肌苷酸钠与L-谷氨酸钠之比为1:7,即有明显增强鲜味的效果)。其盐酸溶液的最大吸收波长为250nm士2nm。遇动植物中磷酸酯酶可分解而失去鲜味。44℃开始失去结晶水,120℃以上成无水物。易溶于水(13g/100ml,20℃),水溶液呈中性,微溶于乙醇,几乎不溶于乙醚。天然品存在于鲔鱼等中。 用途 鲜味剂。如在酱油中加入5~10万分之一,即呈特殊鲜味。一般均与味精、鸟苷酸钠等合用,以提高增鲜效果。用途 肌苷酸钠液时国内外允许使用的呈味剂,较少单独应用,常与味精一起混合使用,混用时鲜味有相乘的作用。我国规定可用于各类饲料、食品添加剂,按生产需要适量使用。用途 肌苷酸钠也是国内外允许使用的呈味剂,单独应用较少,常与味精混合一起使用,混用时鲜味有相乘的作用。我国规定可用于各类食品,按生产需要适量使用。用途 主要用于各种原因引起的白细胞减少和急慢性肝病。生产方法 方法一、肌苷酸脱磷酸法肌苷酸二钠的制备 棒状杆菌269发酵,发酵液去菌体,吸附,洗脱,浓缩,加乙醇,pH7-7.5条件下结晶可得肌苷酸二钠。 棒状杆菌269[发酵]→发酵液[去菌体,吸附,洗脱,浓缩]→浓缩液[乙醇]→[pH7-7.5]肌苷酸二钠 肌苷粗品的制备 在乙酸缓冲液中,调pH5.4-5.6,加压137-147kPa,脱磷酸5h,可得肌苷粗品。 肌苷酸二钠[乙酸,加压]→肌苷 精制 蒸馏水溶解,pH=6,重结晶,可得精品。 方法二、一步发酵法 菌株选育 变异芽孢杆菌7171-9-1移接到斜面培养基上,30-32℃培养48h。斜面培养基成分为葡萄糖1%,蛋白胨0.4%,酵母浸膏0.7%,牛肉浸膏1.4%,琼脂2%,在pH7、120℃灭菌20min。 变异芽孢杆菌7171-9-1[斜面培养]→[30-32℃, 48h]菌种斜面 种子培养 一级种子:培养基成分为葡萄糖2%,蛋白胨1%,酵母浸膏1%,玉米浆0.5%,尿素0.5%,氯化钠0.25%。灭菌前pH 7,用1L三角瓶装150ml培养基,115℃灭菌15min。每个三角瓶中接入白金耳环菌苔,在往复式摇床上,32℃±1℃培养18h。 二级种子:培养基同一级种子,放大50L发酵罐,定容体积25L,接种量 3%,32℃±1℃培养12-15h,搅拌速度320r/min,通风量1:0.25V/(V·min),生长菌指标 A(650nm)=0.78,pH=6.4-6.6。 菌种斜面[摇床振荡]→[pH7, 32℃±1℃, 18h]一级种子培养液[50L发酵罐]→[pH6.4-6.6, 32℃±1℃, 12-15h]二级种子培养液 发酵 50L不锈钢标准发酵罐,定容体积35L。培养基成分为淀粉水解糖10%,干酵母水解液1.5%,豆饼水解液0.5%,尿素0.4%,硫酸镁0.1%,氯化钾0.2%,磷酸氢二钠0.5%,硫酸铵1.5%,有机硅油0.05%。pH=7,接种量0.9%,32℃±1℃培养93h,搅拌速度320r/min,通风量1:0.5V/(V·min)。500L发酵罐,定容体积350L。培养基成分为淀粉水解糖10%,干酵母水解液1.5%,豆饼水解液0.5%,硫酸铵1.5%,硫酸镁0.1%,氯化钾0.2%,磷酸氢二钠0.5%,碳酸钙1%,有机硅油小于0.3%。pH=7,接种量7%,32℃±1℃培养75h,搅拌速度230r/min,通风量1:0.25V/(V·min)。 20000L 发酵罐,培养基同上,接种量2.5%, 35℃±5℃培养83h。 二级种子培养液[50L发酵罐]→[pH7, 32℃±1℃, 93h]发酵液[500L发酵罐]→[pH7, 32℃±1℃, 75h]发酵液[20000L发酵罐]→[pH7, 35℃±1℃, 83h]发酵液 提取、吸附、洗脱 将发酵液30-40L 调pH=2.5-3,连同菌体通过2个串联的3.5kg 732H树脂柱吸附。用相当于树脂总体积3倍的pH 3水洗1次,把两柱分开,用pH 3水把肌苷洗脱下来,再经769活性炭柱吸附肌苷,先用2-3倍体积的水洗涤,再用70-80℃水洗,70-80℃,1mol/L氢氧化钠溶液浸泡30min,最后用0.01mol/L氢氧化钠溶液洗脱肌苷,收集洗脱液,真空浓缩,pH11或6放置,过滤,得粗品。 发酵液[732树脂柱]→[pH2.5-3]吸附物[水]→[pH2.5-3]洗脱液[769活性炭柱]→吸附物[蒸馏水,氢氧化钠]→[70-80℃][氢氧化钠]→[70-80℃]洗脱液[浓缩结晶]→[pH11或6]肌苷粗品 精制 将粗品配成5%-10%的溶液,加热溶解,抽滤,冷却,过滤,少量水洗,烘干,即得肌苷精制品。 肌苷粗品[蒸馏水]→[重结晶]肌苷成品。 生产方法 核糖核酸(RNA)水解法细胞中含有核糖核酸和脱氧核糖核酸(DNA),而RNA水解可得4种核苷酸:腺苷酸、鸟苷酸、胞苷酸和尿苷酸,其中鸟苷酸和由腺苷酸转化而来的肌苷酸是呈味物质。核苷酸有2’-核苷酸、3’-核苷酸和5’-核苷酸,其中只有5’-核苷酸即5’-鸟苷酸和5’-肌苷酸具有呈味性能。 RNA的提取常以RNA含量较高的酵母(最为常用)和白地霉细胞(含RNA4~11%)为原料,采用稀碱液抽提。将酵母干细胞用水配成5%~10%的悬浮液,加入氢氧化钠使其质量分数达1%;在20℃下搅拌30~45min,再用6mol/L的盐酸中和至Ph=7.0;加热至900c时保温10min,以杀灭霉菌,再冷却至2~4℃静置2~3d;取上层清液用6mol/L的盐酸调Ph值至2.5(RNA等电点),在2~4℃静置过夜;过滤得RNA,并用乙醇洗涤、干燥得RNA含量60%~70%的产品,产率4%~5%。酵母细胞也可在6%、8%的盐酸中浸提。 RNA水解 在30℃下将橘青霉菌ThoM的紫外线变异株N-10-14用麸皮培养5d,用90L的水抽提50kg的曲,得89L含有强力核酸酶P1(5’-磷酸二酯酶)的抽提液;将400mL酶液加入10L0.8%的RNA溶液中,调Ph值为5.6,并在65℃下反应2h,得混合核苷酸(腺苷酸0.22%、鸟苷酸0.19%、尿苷酸0.18%和胞苷酸0.14%)。 核苷酸的分离 利用各种核苷酸具有不同的等电点,用强碱性阴离子交换树脂来分离。将上述核苷酸混合液调Ph值至8,用国产717树脂上柱吸附,再依次用0.02mol/L甲酸、0.15mol/L甲酸、0.01mol/L甲酸-0.05mo1/L I甲酸钠和0.1 mol/L甲酸-0.1 mol/L甲酸钠洗脱,分别得到胞苷酸、腺苷酸、尿苷酸和鸟苷酸。 从腺苷酸制备肌苷酸钠 在30℃下用麸皮培养米曲霉48h,加10倍的水浸泡3h,得脱氨酶液;在腺苷酸液中加入10%的脱氨酶液,并在50~60℃和Ph=6下反应3h;加热至100℃以杀酶,过滤,取清液真空浓缩、结晶得产品肌苷酸二钠。 发酵法生产5L肌苷酸钠 生产中主要采用的发酵法为葡萄糖直接发酵法,或葡萄糖发酵生产肌苷,再磷酸化生成肌苷酸。 直接发酵法——一步法 以葡萄糖为碳源,异变株或产氨短杆菌为生产菌,直接发酵生产肌苷酸。 二步法 以60~70g/L的葡萄糖为碳源,以枯草芽孢杆菌为生产菌,在30~32℃、Ph=5~7下发酵80h生产肌苷;肌苷再与磷酸三乙酯反应生成肌苷酸。 生产方法 1核糖核酸(RNA)水解法细胞中含有核糖核酸和脱氧核糖核酸(DNA),而RNA水解可得4种核苷酸:腺苷酸、鸟苷酸、胞苷酸和尿苷酸。其中鸟苷酸和由腺苷酸转化而来得肌苷酸是呈味物质。核苷酸有2’-、3’-和5’-核苷酸,其中只有5’-核苷酸即5’-鸟苷酸和5’-肌苷酸具有呈味性能。(1)RNA的提取。常以RNA含量较高的酵母(最为常用)和白地霉细胞(含RNA4%-11%)为原料,采用稀碱液抽提。将酵母干细胞用水配成5%-10%的悬浮液,加入氢氧化钠使其质量分数达1%;在20℃下搅拌30-45min,再用6mol/L的盐酸中和至PH=7.0,加热至90℃时保温10min,以杀灭霉菌,再冷却至2-4℃静置2-3天;取上层清液用6mol/L的盐酸调PH至2.5(RNA等电点),在2-4℃静置过夜;过滤得RNA,并容乙醇洗涤、干燥得RNA含量60-70%的产品,产率4%-5%酵母细胞也可在6%-8%的盐酸中浸提。 (2)RNA水解。在30℃下将橘青霉素ThoM的紫外线变异株N-10-14用麸皮培养5天,用90L的水提取50kg的曲,得89L含有强力核算酶P1(5’-磷酸二酯酶)的抽提液;将400mL酶液加入10L0.8%的RNA溶液中,调PH为5.6,并在65℃下反应2h,得混合核苷酸(腺苷酸0.22%、鸟苷酸0.19%和胞苷酸0.14%)。 (3)核苷酸的分离。利用各种核苷酸具有不同等电的性质,用强碱性阴离子交换树脂来分离。将上述核苷酸混合液调PH至8,用国产717树脂上柱吸附,再依次用0.02mol/L甲酸、0.15mol/L甲酸、0.01mol/L甲酸+和0.1mol/L甲酸+0.1mol/L甲酸钠洗脱,分别得到胞苷酸、腺苷酸、尿苷酸和鸟苷酸。 (4)从腺苷酸制备肌苷酸钠。在30℃下用麸皮培养米曲霉48h,加10倍水浸泡3h,得脱氨酶液;在腺苷酸液中加入10%的脱氨酶液,并在50-60℃和PH=6下反应3h;加热至100℃以杀酶,过滤,取清液真空浓缩、结晶得产品肌苷酸二钠。 2 发酵法生产5’-肌苷酸钠 生产中采用的发酵法主要为葡萄糖直接发酵法,或葡萄糖家教生产肌苷,再磷酸化生成肌苷酸。 (1)直接生产发酵—— 一步法。以葡萄糖为碳源,异变株或产氨短杆菌为生产菌,直接发酵生产肌苷酸。 (2)二步法。以60-70g/L的葡萄糖为碳源,以枯草芽孢杆菌为生产菌,在30-32℃、PH=5-7下发酵80h生产肌苷;肌苷再与磷酸三乙酯反应生成肌苷酸。 生产方法 由酵母所得核酸分解、分离而得。淀粉糖化液(葡萄糖)经直接发酵法制得肌苷酸,作选择性羟基磷酸化,再精制中和成钠盐后结晶而得。
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