1,4,7,10-四氮杂环十二烷(1 g, 5.81 mmol)在0℃氮气条件下溶于干乙腈(20 ml)中。搅拌后加入NaHCO3 (1.464 g, 17.44 mmol)。在10 ml乙腈中缓慢加入溴乙酸叔丁酯(3.4 g, 17.44 mmol) 1 h，在0℃下搅拌3 h，在室温下搅拌45 h，用二氯甲烷(DCM):甲醇(9:1)(Rf 0.67)薄层色谱法监测反应过程。反应完成后，对反应混合物进行过滤，将滤液蒸发至干燥。粗化合物以2%甲醇在DCM中作为洗脱液，经硅胶柱层析纯化，得到化合物1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸三叔丁酯(DO3A叔丁酯),为白色粉末，收率83.5%。DOTA tert-Butyl ester是cyclic tosamide苄基衍生物。