N-Fmoc-N'-三苯甲基-L-组氨酸属于L-组氨酸类衍生物，是一种人类必需氨基酸，与其他氨基酸相比，除一些常见的化学反应外L-组氨酸由于其右侧链咪唑基与重氮苯磺酸能形成棕红色化合物，即波利(Pauly)反应。在一个干燥的反应烧瓶中，将N-脱保护的氨基酸溶于0.15 M碳酸钠(2~3 equiv.)中，然后往上述反应混合物中加入9-芴甲基-N-琥珀酰亚胺基碳酸酯(1~1.2 equiv.)的丙酮溶液( 0.1 M )。往反应体系中加水以调节反应体系的pH，使之为9~10。所得的反应混合物在室温下搅拌反应4小时，反应结束后将所得的反应混合物在30 ℃下于减压状态下进行浓缩以除去丙酮，所得的残余物用H2O稀释并用0.6 M碳酸钠溶液将溶液pH调至9~10。所得的溶液用乙醚萃取两次。往所得的有机溶液中缓慢地加入10 %的柠檬酸将水相的pH调节至4-5。分离出有机层并用无水硫酸钠进行干燥，过滤除去干燥剂并将所得的滤液在真空下进行浓缩，所得的粗品经硅胶柱色谱法进行分离纯化即可得到N-Fmoc-N'-三苯甲基-L-组氨酸分子。