在250mL三口烧瓶中加入浓硫酸(100mL)，机械搅拌下在0-10℃时缓慢加入靛红酸酐 (30.0g,0.18mol)，搅拌溶解后滴加98％的发烟硝酸(14.2g,0.22mol)，维持温度0-5℃，1h滴加完毕，并保温继续反应1h，停止搅拌，将反应液缓慢倒入300mL冰水混合物中，搅拌 20min，固体充分析出，过滤，水洗，干燥后得5-硝基靛红酸酐(37.0g,收率：96.6％)。 m.p.263.8-265.3℃；HPLC测量纯度为97.2％(流动相为乙腈:20mmol/L KH₂PO₄水溶液 (pH3.25)＝30:70，V/V)。